HPLC分析中,样品需要衍生化处理的目的在于将不适用于液相色谱分析的物质转变为易于分析的衍生物,通过改善化合物的物理化学性能从而改变其选择性,提高待分析物的检测灵敏度,常用的方法是给不能被检测物质的结构中加入发色团,使其能够被检测。柱前衍生是目前应用广泛的衍生技术。
柱前衍生是指待测物在液相色谱分离前就完成衍生化,再根据衍生物的性质进行色谱分离检测,若衍生过程所用的试剂若能稳定存在,且衍生反应条件成熟可靠时,其优势体现在对设备要求不高,可以人工衍生,且衍生后的副产物可以经过预处理步骤除去,相应的,手工衍生化过程会受到人为因素的影响。
柱后衍生是指待测物先经过色谱分离后,然后进入反应器中与衍生化试剂反应,后进入检测器的衍生化方法。该方法可以实现分析的自动化,反应重现性好,不影响被测物的色谱行为,但不利点在于需要配备额外的反应装置和反应设备,过长的设备管线会使从色谱柱中出来的样品在管路中造成峰扩展,导致分离度降低。
柱后衍生又称柱后反应,利用衍生反应使被测物与相应的试剂分析反应,以改变其物理或化学性质,使其被检测到。例如将发色基团或荧光基团键合到样品中去,多极放大检测灵敏度,柱后衍生系统开创了柱后衍生系统性能、价格及外形的新标准。反应器设计,造就了新一代柱后衍生系统高性能和低价格。