鸡传染病支气管炎试剂盒_鸡气管炎抗体检测试剂盒
使用前,请务必仔细阅读说明书,如有不清楚的,请拨打24h技术支持专线:0714-6338558或18171667592/18108699172,咨询清楚再进行实验。
【产品名称】
通用名称:鸡传染性支气管炎病毒抗体检测试剂盒(ELISA)
英文名称:Test Kit for Antibodies to Infectious Bronchitis Virus(ELISA)
【包装规格】
48T/盒,96T/盒
【预期用途】
本试剂用于检测鸡血清中传染性支气管炎病毒抗体,可用于鸡传染性支气管炎病毒抗体疫苗免疫效果评价。
【检验方法】
试剂准备
1、使用前,所有的组分都要至少复温2h,确保充分复温到室温。
2、浓缩洗涤液:从冰箱取出的浓缩洗涤液,会有结晶产生,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解。浓缩洗涤液与蒸馏水,按1:20稀释,即1份的浓缩洗涤液,添加19份的蒸馏水。
3、底物:底物液A和B,在使用前,按1:1体积充分混合,混合后10分钟内使用。
操作程序
1、所有试剂和组分都先恢复到室温,标准品、质控品和样品,建议做复孔。
2、按前面试剂准备中描述的方法,配制好试剂盒各种组分的工作液。
3、从铝箔袋中取出所需板条,剩余的板条用自封袋密封放回冰箱。
4、设置阴阳性对照孔、样本孔,阴阳性对照孔各加对照品100μL,样本孔加稀释后样本100μL。
5、用封板膜盖住反应板,37℃水浴锅或恒温箱温育30min。
6、揭开封板膜,弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置20s,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复4次(共洗板5次)。若使用自动洗板机,请按洗板机操作程序进行洗板,添加浸泡20s的程序,可以提高检测的精度。洗板结束,加底物前,要在干净不掉屑的纸上,充分拍干反应板。
7、所有孔加入辣根过氧化物酶标记的检测抗体100μL。
8、用封板膜盖住反应板,37℃水浴锅或恒温箱温育30min。
8、揭开封板膜,弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置20s,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复4次(共洗板5次)。若使用自动洗板机,请按洗板机操作程序进行洗板,添加浸泡20s的程序,可以提高检测的精度。洗板结束,加底物前,要在干净不掉屑的纸上,充分拍干反应板。
9、将底物A和B按1:1体积充分混合,所有孔中加入底物混合液100μL。用封板膜盖住反应板,37℃水浴锅或恒温箱温育10min。
10、每孔加终止液50μl,混匀,于450nm(可用630nm作参比波长)测定各孔吸光值(A值),无参比波长用空白孔调零(即所有孔吸光值减去空白孔吸光值)。
【参考值】
实验正常的情况下,阴性对照≤0.12,阳性对照≥0.58。
【检验结果的解释】
1.样品A值≥0.37为阳性;样品A值在0.2到0.37之间为可疑;样品A值<0.2为阴性。
2.本实验结果为阴性或可疑时表明猪只抗体水平不足,建议补打相应疫苗。